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酶标记物方法注意事项
发布时间： 2015-06-11 点击次数： 1212次酶标记物包括酶标记抗原、酶标记抗体和酶标记SPA等。酶标记物质量的好坏直接关
系到免疫酶技术的成功与否，因此被称为关键的试剂。酶标记物中zui常用的是酶标记抗
体，它是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成。酶标记抗体的质量主要取决于纯度好、
活性强及亲和力高的酶和抗体，其次要有良好的制备方法。目前，高质量的酶(如辣根过氧
化物酶，简称HRP)国内已有商品供应。高质量的抗体则可通过提取纯化而获得。在制备方
法上，宜选用产率高、不影响结合物的活性和不混杂干扰性物质且操作简便易行的方法。注意事项
1. 在具备高质量HRP的条件下，所要标记的抗体也要活性高,效价高(zui低1∶16),纯度
高，亲和力好，这是保证标记物效价高，免疫活性好的首要条件。
2. 所使用试剂的PH和浓度及用量必须严格掌握。所用试剂，(或必需)新鲜配
制。如在戊二醛标记法中所用戊二醛应为新鲜纯品，因戊二醛储存过久可形成缩和体(杂
质)。否则，影响标记效果。
3. 室温搅拌时须避光，室内温度一般在25℃为宜。标记物每次透析前，须认真检
查，防止漏液。
4. 浓的标记物相当稳定，常加入30～40％甘油于-10℃下保存。4℃可保存1～2年，但
稀释成1∶10，只能保存数周。已配制的使用液应在12小时内用完。切忌反复冻融。- 上一篇：ELISA试剂盒测定方式总结
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